雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒參數(shù):
編號(hào) | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F4997-A | 雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒 | Chicken soluble endothelial protein C receptor,sEPCR elisa Kit | 48T |
雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
主要優(yōu)點(diǎn)1、簡易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;5、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
使用方法1、 血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;4.(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。編輯本段進(jìn)口分裝進(jìn)口分裝:檢測范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種疾病的生長因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測小鼠血清和細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運(yùn)用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強(qiáng)度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)[3]
注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個(gè)月
產(chǎn)品全稱:G蛋白偶聯(lián)受體54抗原,KiSS-1R/GPR54/GPCR54抗體供應(yīng)商上海廣銳生物最專業(yè)的G蛋白偶聯(lián)受體54抗原,KiSS-1R/GPR54/GPCR54抗體供應(yīng)商, 品牌抗體、進(jìn)口抗體,公司專營。公司以有影響力的銷售方式吸引廣大科研工作者的購買,不光買的放心、安心,提供免費(fèi)實(shí)驗(yàn)過程中遇到問題的免費(fèi)技術(shù)指導(dǎo)方面給予客戶力所能及的支持。產(chǎn)品詳細(xì)介紹:1、濃度:1mg/1ml2、交叉反應(yīng):hu, mo, rat, cow, dog3、產(chǎn)品類型:一抗4、研究領(lǐng)域:5、蛋白分子量:predicted molecular weight: 30kDa6、性狀:Lyophilized or Liquid7、免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADO C-terminus8、亞型:polyclonal9、純化方法:affinity purified by Protein A10、儲(chǔ)存液:0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide11、產(chǎn)品應(yīng)用:WB=1:100-500IHC-P=1:100-500IHC-F=1:100-500IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù)) not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。編輯本段常用的染色方法 根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標(biāo)法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對(duì)某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。
其他產(chǎn)品展示G蛋白偶聯(lián)受體54抗原,KiSS-1R/GPR54/GPCR54抗體供應(yīng)商,免疫組化抗體、免疫印跡抗體、細(xì)胞流式抗體ab21075 Goat polyclonal to Diphtheria Toxin (FITC) 100ul 3450 ab21076 Mouse monoclonal [6] to FANCD2 100ug 3450 ab21077 Mouse monoclonal [4E4] to TRF1 100ug 3450 ab21078 Rabbit polyclonal to XPC 100ul 3450 ab2108 Rabbit polyclonal to Acid Phosphatase 500ul 3450 ab21080 Rabbit polyclonal to DDB1 100ug 3450 ab21082 Rabbit polyclonal to XPC 100ul 3450 ab21083 Rabbit polyclonal to 53BP1 100ul 3450 ab21084 Mouse monoclonal [6F5] to Chk1 100ug 3450 ab21085 Rabbit polyclonal to XAB2 100ul 3450 ab21086 Rabbit polyclonal to FANCC 100ug 3450 ab21088 Mouse monoclonal [38.4] to RAD54 100ug 3450 ab21089 Rabbit polyclonal to Kv1.6 100ug 3450 ab2109 Goat polyclonal to HRP 500ul 3450 ab21090 Mouse monoclonal [SPM167] to Plasma Membrane Ca2+ Pump 500ul 3450 ab21093 Mouse monoclonal [357] to Verotoxin I/SLT 1b 100ug 3450 ab21096 Mouse monoclonal [802] to Neisseria gonorrhoeae 100ug 3450 ab21098 Mouse monoclonal [TV46] to Vaccinia Virus 500ug 3450 ab21099 Goat polyclonal to FeLV p27 100ul 3450 ab211 Sheep polyclonal to Cathepsin B 1ml 3450 ab2110 Mouse polyclonal to HRP 100ul 3450 ab21100 Rabbit polyclonal to Lipoteichoic Acid 100ul 3450 ab21101 Mouse monoclonal [803] to Valproic Acid 500ul 3450 ab21103 Rat monoclonal [TY25] to B7 DC (Phycoerythrin) 100ug 3450 ab21104 Mouse monoclonal [135] to Chlamydia trachomatis MOMP 100ul 3450 ab21106 Mouse monoclonal [6A1] to Hepatitis C Core Antigen 100ug 3450 ab21107 Rat monoclonal [TY25] to B7 DC 100ug 3450 ab21108 Mouse monoclonal [4A83] to Smoothelin 50ug 3450 ab21109 Mouse monoclonal [SOD2] to Superoxide Dismutase 1 100ug 3450 ab2111 Rabbit polyclonal to liver Arginase 1mg 3450 ab21110 Goat polyclonal to E.coli O + E.coli K (HRP) 100ul 3450 ab21112 Sheep polyclonal to HSV2 100ul 3450 ab21113 Goat polyclonal to Nebraska Calf Diarrhea Virus (HRP) 100ul 3450 ab21114 Mouse monoclonal [072] to Streptococcus Group B 100ug 3450 ab21117 Rabbit polyclonal to Klebsiella 100ul 3450 ab21118 Rabbit polyclonal to Salmonella (Biotin) 100ul 3450 ab21119 Mouse monoclonal [B7/21] to HLA DP (FITC) 100ug 3450 ab21120 Mouse monoclonal [300] to HHV6 100ug 3450 ab21124 Goat polyclonal to HCV NS3 1ml 3450 ab21126 Mouse monoclonal [BDI560] to Streptococcus agalactiae 100ug 3450 ab21127 Mouse monoclonal [ITEM-4] to TWEAKR 100ug 3450 ab21129 Mouse monoclonal [ITEM-4] to TWEAK (Biotin) 100ug 3450 ab21130 Mouse monoclonal [ME.125] to Thyroxine 250ug 3450 ab21131 Armenian Hamster monoclonal [MD5-1] to DR5 100ug 3450 ab21134 Mouse monoclonal [BDI506] to EBV Bam HI Z 100ug 3450 H33342熒光染料/赫斯特?zé)晒馊剂?3342/熒光染料H33342/雙苯并咪唑H33342三鹽酸鹽/HOE 33342/Hoechst 33342 生物技術(shù)級(jí),98% 25毫克 100毫克熒光素/熒光紅/熒光黃/熒光橙紅/酸性黃73/螢光素/螢光紅/螢光黃/2-(6-羥基-3-氧代-3H-呫噸-9-基)苯甲酸/熒光橙/螢光橙黃/熒光酯/Fluorescein AR 25克 500克熒光素鈉/螢光素鈉/熒光紅鈉/熒光黃鈉/熒光黃二鈉/熒光素二鈉/螢光橙紅鈉/螢光素二鈉/9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-呫噸-3-酮二鈉鹽//Fluorescein disodium salt BS 25克 1公斤 試劑級(jí) 25克 100克4,6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽/DAPI染色液/DAPI 生物技術(shù)級(jí),98% 10毫克酚酞/酚/酚麩酞/酚麩/3,3-雙(4-羥基苯基)-1(3H)-異苯并呋喃酮/3,3-雙(對(duì)羥基苯基)苯酞/非諾夫他林/果導(dǎo)/Phenolphthalein IND 25克酚酞試紙/Phenolphthalein test paper SZ 5盒酚酞絡(luò)合指示劑/酚酞-3,3’-雙-(亞甲氨基二乙酸) /Phenolphthalexone IND 5克百里酚/百里香酚/麝香草酚/麝香草腦/5-甲基-2-異丙基酚/6-異丙基-3-甲基酚/2-異丙基-5-甲基苯酚/3-羥基對(duì)異丙基甲苯/Thymol AR,99% 100克羅丹明123/若丹明123/Rhodamine 123 生物技術(shù)級(jí),90% 5毫克 50毫克羅丹明B/玫瑰紅B/堿性紫10/四乙基羅丹明/若丹明B/羅丹明610/蕊香紅B/玫瑰精B/藍(lán)光堿性蕊香紅/堿性桃紅/9-(2-羧基苯基)-3,6-雙(二乙氨基)占噸翁氯化物/堿性玫瑰精/堿性玫瑰精B/Rhodamine B AR 25克 500克3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺/TMB游離酸/3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯-4,4’-二胺/3,3',5,5'-四甲基對(duì)二氨基聯(lián)苯/TMB BR,99% 1克 10克 100克3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺溶液/TMB游離酸溶液/TMB溶液/3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid-1 component 生物技術(shù)級(jí) 100毫升3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺底物溶液/TMB底物溶液/3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid membrane substrate 生物技術(shù)級(jí) 100毫升3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽/TMB鹽酸鹽/3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸鹽/二鹽酸3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺/TMB?2HC1 BR,98% 1克 5克 25克 高純,98% 1克 5克3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺-US/TMB-US(ultra sensitive) solution BR 250毫升3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺-Stop/TMB-Stop solution BR 250毫升異硫氰酸熒光素/異硫氰酸熒光橙紅/異硫氰酸熒光黃/異硫氰酸熒光紅/異硫氰酸熒光素酯/異硫氰酸熒光素異構(gòu)體I/5-異硫氰酸熒光素/熒光素-5-異氰酸酯/異硫氰酸熒光酯異構(gòu)體/異硫氰酸熒光素(同分異構(gòu)體I)/熒光素5-異硫氰酸鹽/FITC 偶聯(lián)級(jí),90% 100毫克 500毫克 1克二乙酸螢光素/二乙酸熒光素/熒光素二乙酸鹽/熒光素二乙酸酯/二乙酰熒光素/熒光素雙醋酸酯/醋酸熒光素/熒光胺雙乙酸鹽/3,6-二乙酸基熒光素/FDA ACS 1克 5克 25克二氯熒光素/2ˊ,7ˊ-二氯熒光素/2ˊ,7ˊ-二氯熒光黃/2',7'-二氯-3',6'-二羥基螺[異苯并呋喃-1(3H),9'-(9H)占噸]-3-酮/2,7-二氯-3,6-螢烷二醇/Fluorescein dichloride 高純,95% 5克 25克3',6'-二氯熒光素/3ˊ,6ˊ-二氯熒光橙紅/3ˊ,6ˊ-二氯熒光紅/3ˊ,6ˊ-二氯熒光黃/3ˊ,6ˊ-二氯熒烷/氯化熒光素/3',6'-Dichlorofluoran BR,95% 5克 25克
北京百奧萊博科技有限公司專業(yè)生產(chǎn)供應(yīng)柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒,PCR級(jí)銷售,產(chǎn)品信息:
類別:分子生物學(xué)試劑
英文名:Column Animal mtDNAOUT,PCR Grade
產(chǎn)品名 | 產(chǎn)品編號(hào) | 包裝規(guī)格 |
柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒,PCR級(jí) | BTN80803 | 50次 |
產(chǎn)品簡介:
線粒體DNA(mtDNA)是進(jìn)行分子進(jìn)化研究和母性遺傳研究的重要材料,但傳統(tǒng)的兩步式mtDNA提取方法是先溫和裂解細(xì)胞,分離線粒體,然后再從線粒體中提取mtDNA。此方法中的溫和裂解細(xì)胞的條件十分難以控制,需要針對(duì)不同組織材料單獨(dú)進(jìn)行優(yōu)化。本方法克服了上述缺點(diǎn),具有下列優(yōu)點(diǎn):
1.不需要單獨(dú)純化線粒體,柱式法純化,操作簡單快捷。
2.得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。
3.每107個(gè)動(dòng)物細(xì)胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克組織一般能得到3-5μg mtDNA。
4.注意:本產(chǎn)品只適合于動(dòng)物材料,不適合于植物材料。
使用及效果:
在107個(gè)細(xì)胞或1克剪碎的組織中加入0.25 mL溶液A,吹打分散,再加入0.25 mL溶液B,混勻后冰浴8分鐘,加入0.35 mL溶液C后混勻,12000 g離心10分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,離心1分鐘,用0.5 mL 的通用洗柱液洗兩次,最后用30-50 μL DNA洗脫液將mtDNA洗脫。
運(yùn)輸及保存:
常溫,有效期一年。
柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒,PCR級(jí)銷售專業(yè)優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商:北京百奧萊博科技有限公司
關(guān)鍵詞:柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒,PCR級(jí),BTN80803,Column Animal mtDNAOUT,PCR Grade
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編號(hào) | 類別 | 名稱 |
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DMSO(PCR級(jí))低價(jià)促銷 產(chǎn)品說明:
貨號(hào):NP0001
規(guī)格:10ml
儲(chǔ)存條件:RT,避光,12個(gè)月
用途:提高PCR擴(kuò)增效率,能夠使高GC含量的DNA更容易擴(kuò)增,又稱為二甲亞砜/二甲基亞砜
注意事項(xiàng):高于HPLC級(jí),無菌管分裝
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QQ1904801596
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我公司自行開發(fā)生產(chǎn)產(chǎn)品
一、 Vector
(一)、pBM-T載體
是一種克隆PCR產(chǎn)物(TA cloning)的專用載體,它是一種新型的T載體系統(tǒng)。與其他常用的pGEM-T Vector相比,它有兩個(gè)優(yōu)點(diǎn):
1、 pBM-T載體的兩個(gè)3′T是由特殊工藝制作而成,它克服了添加3′T的不穩(wěn)定性,從而大大提高了PCR產(chǎn)物的連接克隆效率;
2、 在克隆后不需要進(jìn)行傳統(tǒng)的藍(lán)白斑鑒定,陽性克隆可直接正選擇,自身環(huán)話的載體將表達(dá)毒性物質(zhì),使宿主細(xì)胞不能存活,由此提高了克隆的陽性率,降低了后續(xù)的工作量。本產(chǎn)品中附帶有對(duì)照插入DN段(約500bp的PCR擴(kuò)增片段),用于驗(yàn)證克隆效率。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品概述 | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) |
VT101-A | pBM-T | (載體),粘端連接、不需藍(lán)白斑鑒定,直接正選擇 | 20ul | 380.00 |
VT102-A | (試劑盒),粘端連接、不需藍(lán)白斑鑒定,直接正選擇 | 20次 | 580.00 |
(二)、pBM-B載體
是由克隆平末端DNA的載體系統(tǒng)。與常用的pGEM-T Vector相比,pBM-B載體不需要對(duì)高保真的耐熱DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物加A就可以直接進(jìn)行連接;與傳統(tǒng)的平末端載體相比,pBM-B載體克隆可直接進(jìn)行正選擇,自身環(huán)化的載體將表達(dá)毒性物質(zhì),使宿主細(xì)胞不能存活,由此提高了克隆的陽性率,減少了后續(xù)的工作量。本產(chǎn)品中附帶有對(duì)照插入DN段(約500bp的PCR擴(kuò)增片段),用于驗(yàn)證克隆效率。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品概述 | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) |
VB101-A | pBM-B | (載體),平端連接、自身環(huán)化產(chǎn)生內(nèi)毒素陽性率高 | 20ul | 380.00 |
VB102-A | (試劑盒),平端連接、自身環(huán)化產(chǎn)生內(nèi)毒素陽性率高 | 20次 | 580.00 |
(三)、pEA-T載體
pEA-T載體用于TA克隆,有以下特點(diǎn):
1、 快速克隆基因。本試劑提供一種的連接緩沖液Ligation Solution I,僅需要5分鐘反應(yīng)時(shí)間;
2、 便于篩選重組子,提高克隆效率。提供氨芐青霉素和卡那霉素兩種篩選標(biāo)記。當(dāng)某個(gè)基因來源于含有氨芐青霉素基因質(zhì)粒時(shí),可以選擇卡那霉素篩選標(biāo)記;當(dāng)某個(gè)基因來源于含有卡那霉素質(zhì)粒時(shí),可以選擇氨芐青霉素篩選標(biāo)記,降低了克隆北京,對(duì)照插入片段克隆效率可達(dá)95%以上。
3、 容易判斷載體中有無外源基因的插入。包含lacZ基因,在含有IPTG,X-gal的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,很容易判斷載體中有無外源基因插入。
(四)、pEA-B載體
pEA-T載體用于平端克隆,有以下特點(diǎn):
4、 快速克隆基因。本試劑提供pEA-B載體,一種的連接緩沖液Ligation Solution I,僅需要5分鐘反應(yīng)時(shí)間;
5、 便于篩選重組子,提高克隆效率。提供氨芐青霉素和卡那霉素兩種篩選標(biāo)記。當(dāng)某個(gè)基因來源于含有氨芐青霉素基因質(zhì)粒時(shí),可以選擇卡那霉素篩選標(biāo)記;當(dāng)某個(gè)基因來源于含有卡那霉素質(zhì)粒時(shí),可以選擇氨芐青霉素篩選標(biāo)記,降低了克隆北京,對(duì)照插入片段克隆效率可達(dá)90%以上。
6、 容易判斷載體中有無外源基因的插入。包含lacZ基因,在含有IPTG,X-gal的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,很容易判斷載體中有無外源基因插入。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品概述 | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) |
VB201-A | pEA-T | 試劑盒,粘端連接、氨芐青霉素和卡那霉素兩種篩選標(biāo)記 | 20次 | 580.00 |
VB202-A | pEA-B | 試劑盒,氨芐青霉素和卡那霉素兩種篩選標(biāo)記 | 20次 | 580.00 |
(五)本公司同時(shí)還提供大量的載體資源:真核、原核、酵母表達(dá)載體,克隆載體。更多詳細(xì)信息,請咨詢銷售人員。
二、 PCR實(shí)驗(yàn)相關(guān)產(chǎn)品
(一)、Taq DNA Polymerase
本產(chǎn)品在PCR反應(yīng)中,其延伸速度為1-2Kb/分鐘,產(chǎn)物3′端帶A,可直接用于T/A載體克隆。以£ DNA為模板,能夠很好地?cái)U(kuò)增9Kb以下的DN段。
(二)、2xTaq PCR Mix
本產(chǎn)品包含酶dNTP和優(yōu)化的緩沖液,濃度為2x。DNA擴(kuò)增是,只需加入模板,引物和水,使Mix溶液的濃度為1x即可進(jìn)行反應(yīng)。具有快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。進(jìn)行PCR擴(kuò)增可以減少操作時(shí)間,避免因多步操作帶來的污染,特別適宜高通量篩選基因的擴(kuò)增,Taq PCR Mix擴(kuò)增產(chǎn)物可用于T/A克隆。
(三)、Dfu DNA Polymerase
本產(chǎn)品具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,能糾正DNA擴(kuò)增過程中產(chǎn)生的堿基錯(cuò)配。Pfu酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有高溫DNA Polymerase中出錯(cuò)率的。其PCR產(chǎn)物為平端,可直接用平端載體克隆。如克隆到T載體上,需加A后再連接。本產(chǎn)品應(yīng)用了獨(dú)特的緩沖液,不但提高了DNA聚合速度,而且增加了片段的擴(kuò)增長度,并且具有快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。
(四)、2xPfu PCR Mix
包含酶dNTP和優(yōu)化的緩沖液,濃度為2x。DNA擴(kuò)增時(shí),只需要加入模板、引物和水,使Mix溶液的濃度為1x即可進(jìn)行反應(yīng),具有快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。進(jìn)行PCR擴(kuò)增可以減少操作時(shí)間,避免因多步操作帶來的污染,特別適宜高通量篩選基因的擴(kuò)增,Pfu PCR Mix擴(kuò)增產(chǎn)物可用于“平端”克隆。應(yīng)用Mix擴(kuò)增時(shí),由于應(yīng)用獨(dú)特的緩沖液,不但提高了DNA聚合速度(1Kb/min,<4Kb;1Kb/2min,>4Kb),而且增加了片段的擴(kuò)增長度。
(五)、dNTP Mixture
1、純度:HPLC檢測(C18柱):大于99.5%。
經(jīng)檢測確認(rèn),用于PCR反應(yīng)時(shí)擴(kuò)增良好。
經(jīng)檢測確認(rèn),不含有Rnase、Dnase。
2、特點(diǎn):★是單品銷售的dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩爾混合液。
★PCR反應(yīng)時(shí),不用稀釋可直接使用。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品概述 | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) | ||
PT101-A | Taq DNA Polymerase | 10xTaq Buffer含Mg2+ | 500u | 180.00 | ||
PT102-A | 10xTaq Buffer不含Mg2+,另外配有25mM Mg2+ | 500u | 180.00 | |||
PT201-A | 2xTaq PCR Mix | 只需要加入模板、引物和水,使Mix溶液的濃度為1x即可進(jìn)行反應(yīng) | 1ml | 120.00 | ||
PP101-A | Pfu DNA Polymerase | 10xPfu Buffer為含Mg2+ | 250u | 180.00 | ||
PP201-A | 2xPfu PCR Mix | 只需要加入模板、引物和水,使Mix溶液的濃度為1x即可進(jìn)行反應(yīng) | 1ml | 180.00 | ||
PD101-A | dNTP Mixture (2.5mM each) | HPLC檢測(C18柱):大于99.5% 不含有Rnase、Dnase | 0.5ml | 60.00 | ||
PD201-A | dNTP Mixture (10mM each) | HPLC檢測(C18柱):大于99.5% 不含有Rnase、Dnase | 0.5ml | 180.00 | ||
PD301-A | dATP(100mM) | HPLC檢測(C18柱):大于99.5% 不含有Rnase、Dnase | 0.25ml | 180.00 | ||
PD301-B | 1ml | 650.00 | ||||
PD302-A | dTTP(100mM) | HPLC檢測(C18柱):大于99.5% 不含有Rnase、Dnase | 0.25ml | 180.00 | ||
PD302-B | 1ml | 650.00 | ||||
PD303-A | dCTP(100mM) | HPLC檢測(C18柱):大于99.5% 不含有Rnase、Dnase | 0.25ml | 180.00 | ||
PD303-B | 1ml | 650.00 | ||||
PD304-A | dGTP(100mM) | HPLC檢測(C18柱):大于99.5% 不含有Rnase、Dnase | 0.25ml | 180.00 | ||
PD304-B | 1ml | 650.00 | ||||
PT301-A | T4 DNA Ligase | 5u/ul | 100u | 120.00 | ||
三、Primer | ||||||
PD401-A | T7 Primer | 5′-TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG-3′ | 200ul(10uM) | 45.00 | ||
PD402-A | SP6 primer | 5′-CAT ACG ATT TAG GTG ACA CTA TAG-3′ | 200ul(10uM) | 45.00 | ||
PD403-A | M13 RV-M Primer | 5′-GAG GGG ATA ACA ATT TCA CAC AGG-3′ | 200ul(10uM) | 45.00 | ||
PD404-A | M13-47 Primer | 5′-CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC-3′ | 200ul(10uM) | 45.00 | ||
PD405-A | T3 Primer | 5′-ATT AAC CCT CAC TAA AGG GAA-3′ | 200ul(10uM) | 45.00 | ||
四、DNA Marker
(一)、100bp DNA Marker
100 DNA Marker為已含有1xloading Buffer的DNA溶液,可取5ul直接電泳,使用十分方便。100bp DNA Marker由DN段1500bp、1000bp、900bp、800bp、700bp、600bp、500bp、400bp、300bp、200bp以及100bp構(gòu)成,每次取5ul電泳時(shí),每條帶的DNA量約為50ng。其中500bp的DN段為150ng,顯示亮帶。
(二)、100bp DNA Marker II
100bp DNA Marker II為已含有1xLoading Buffer的DNA溶液,可取5ul直接電泳,使用十分方便。100bp DNA Marker II由DN段5000bp、3000bp、2000bp、1500bp、1000bp、900bp、800bp、700bp、600bp、500bp、400bp、300bp、200bp以及100bp構(gòu)成,每次取5ul電泳時(shí),每條帶的DNA量約為50ng。其中500bp的DN段為150ng,顯示亮帶。
(三)、DNA Marker DL2000
DNA Marker DL2000為已含有1xLoading Buffer的DNA溶液,可取5ul直接電泳,使用十分方便。 DNA Marker DL2000由DN段2000bp、1000bp、750bp、500bp、250bp以及100bp構(gòu)成,每次取5ul電泳時(shí),每條帶的DNA量約為50ng。
(四)、DNA Marker DL5000
DNA Marker DL5000為已含有1xLoading Buffer的DNA溶液,可取5ul直接電泳,使用十分方便。DNA Marker DL5000由DN段5000bp、3000bp、2000bp、1000bp、750bp、500bp、250bp以及100bp構(gòu)成,每次取5ul電泳時(shí),每條帶的DNA量大于50ng,其中750bp的DN段為100ng。
(五)、DNA Marker DL10000
DNA Marker DL10000為已含有1xLoading Buffer的DNA溶液,可取5ul直接電泳,使用十分方便,電泳圖象十分清晰。DNA Marker DL10000由DN段10000bp、8000bp、6000bp、5000bp、4000bp、3000bp、2000bp、1500bp、1000bp、750bp、500bp以及250bp構(gòu)成,每次取5ul電泳時(shí),每條帶的DNA量大于50ng,其中1500bp的DN段為100ng。
(六)、£ DNA/Hind III Maker
£ DNA/Hind III Maker為已含有1xLoading Buffer的DNA溶液,可取5ul直接電泳,使用十分方便,電泳圖象十分清晰。£ DNA/Hind Marker由DN段23130bp、9416bp、6557bp、4361bp、2322bp、2027bp、564bp以及125bp構(gòu)成,無非特異性,無DNA降解酶。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品概述 | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) |
MD101-A | DNA Marker I | 100、200、300、400、500、600bp | 50次 | 100.00 |
MD102-B | 100次 | 180.00 | ||
MD102-A | 100bp DNA Marker | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500bp | 20次 | 100.00 |
MD102-B | 50次 | 200.00 | ||
MD102-C | 100次 | 350.00 | ||
MD103-A | 100bp DNA Marker II | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、3000、5000bp | 20次 | 110.00 |
MD103-A | 50次 | 220.00 | ||
MD103-A | 100次 | 400.00 | ||
MD201-A | DNA Marker DL2000 | 100、250、500、750、1000、2000bp | 50次 | 110.00 |
MD201-B | 100次 | 190.00 | ||
MD301-A | DNA Marker DL5000 | 100、250、500、750、1000、2000、3000、5000bp | 50次 | 150.00 |
MD301-B | 100次 | 260.00 | ||
MD401-A | DNA Marker DL10000 | 250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000、6000、8000、10000bp | 20次 | 110.00 |
MD401-B | 50次 | 200.00 | ||
MD401-C | 100次 | 360.00 | ||
MD501-A | 1Kb DNA Marker | 1000、2000、3000、4000、5000、6000、8000、10000bp | 50次 | 100.00 |
MD502-B | 100次 | 180.00 | ||
MD601-A | £ DNA/Hind III Maker | 125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130bp | 50次 | 100.00 |
MD602-B | 100次 | 180.00 |
五、蛋白Marker
(一)、中分子量蛋白質(zhì)Marker
本產(chǎn)品是由6種蛋白質(zhì)分別純化后混合而成的蛋白質(zhì)溶液,分子量范圍為14.4KD-97.4KD,經(jīng)過SDS-PAGE凝膠電泳后,用考馬斯亮藍(lán)R-250(Coomassie Blue-250)染色后可得到清晰的6條蛋白質(zhì)帶。
建議使用分離濃度為15%
(二)、預(yù)染染蛋白質(zhì)Marker(藍(lán)色)
本產(chǎn)品包含6種預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì),分子量范圍為14KD-98KD,可以直接觀察蛋白電泳及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)移效果。經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳后轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可得清晰的6條藍(lán)色的蛋白帶。
(三)、預(yù)染染蛋白質(zhì)Marker(彩色)
本產(chǎn)品包含6種預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì),分子量范圍為10KD-98KD,可以直接觀察蛋白電泳及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)移效果。經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳后轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可得清晰的6條不同顏色的蛋白帶。帶色分別為藍(lán)色(98KD)、天藍(lán)色(66KD)、粉紫色(47KD)、磚紅色(30KD)、蔚藍(lán)色(22KD)和亮黃色(14KD)
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品概述 | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) |
MP101-A | 中分子量蛋白質(zhì)Marker | 分子量范圍為14.4-97.4Kda,適用于大多數(shù)蛋白質(zhì)分子量的測定 | 20次 | 100.00 |
MP102-A | 預(yù)染染蛋白質(zhì)Marker(藍(lán)色) | 分子量范圍為14.4-98.0Kda,其蛋白混合物與藍(lán)色染料共價(jià)偶聯(lián),在凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)強(qiáng)度均勻的蛋白帶 | 10次 | 180.00 |
MP102-B | 20次 | 280.00 | ||
MP103-A | 預(yù)染染蛋白質(zhì)Marker(彩色) | 分子量范圍為14.4-98.0Kda,其蛋白混合物與彩色染料共價(jià)偶聯(lián),在凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)強(qiáng)度均勻的蛋白帶 | 10次 | 280.00 |
MP103-B | 20次 | 450.00 |
六、感受態(tài)細(xì)胞和菌株
(一)、TOP10菌株
該菌株的轉(zhuǎn)化效率高達(dá)108以上,適用于的DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增。能高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。
(二)、DH5 a菌株
是一種常用于質(zhì)?寺〉木。其¢80lac△M15基因的產(chǎn)物可于pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。RecA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA提取。
(三)、BL21(DE3)菌株
該菌株用于以T7 RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的外源基因的蛋白表達(dá)宿主。T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達(dá)受控于£噬菌體DE3區(qū)的lacUV5啟動(dòng)子,該區(qū)整合于21的染色體上。該菌適合于非毒性蛋白的表達(dá)。
(四)、BL21(DE3)plysS菌株
該菌株帶有質(zhì)粒plysS,具有氯霉素抗性,次質(zhì)粒含有表達(dá)T7容菌酶的基因,T7容菌酶能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平,但不干擾IPTG誘導(dǎo)的表達(dá)。適合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表達(dá)。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品概述 | 規(guī)格 | 價(jià)格(¥) |
CT101-A | TOP10菌株 | 適用于的DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增。能高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制 | 0.5ml | 180.00 |
CT102-A | TOP10感受態(tài)細(xì)胞 | 化學(xué)轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |
CT103-A | TOP10感受態(tài)細(xì)胞 | 電轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |
CD101-A | DH5 a菌株 | 其¢80lac△M15基因的產(chǎn)物可于pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選 | 0.5ml | 180.00 |
CD102-A | DH5 a感受態(tài)細(xì)胞 | 化學(xué)轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |
CD103-A | DH5 a感受態(tài)細(xì)胞 | 電轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |
CB101-A | BL21(DE3)菌株 | 用于以T7 RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的外源基因的蛋白表達(dá)宿主 | 0.5ml | 180.00 |
CB102-A | BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞 | 化學(xué)轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |
CB103-A | BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞 | 電轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |
CB104-A | BL21(DE3)plysS菌株 | 帶有質(zhì)粒plysS,具有氯霉素抗性,含有表達(dá)T7容菌酶的基因, 適合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表達(dá) | 0.5ml | 180.00 |
CB105-A | BL21(DE3)plysS感受態(tài)細(xì)胞 | 化學(xué)轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |
CB106-A | BL21(DE3)plysS感受態(tài)細(xì)胞 | 電轉(zhuǎn)化 | 10x100ul | 180.00 |